儲存條件
-20℃
中文名稱
土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Soil Nitrate Reductase(S-NR)Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/24S

產品型號：BC3100-50T/24S

更新時間：2025-04-25

廠商性質：生產廠家

訪問量：1724

服務熱線

010-50973130

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產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

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產品介紹

土壤硝酸還原酶（S-NR）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC3100
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
試劑一	液體30 mL×1瓶	-20℃保存
試劑二	液體5 mL×1瓶	-20℃保存
試劑三	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	液體10 mL×1瓶	-20℃保存
試劑五	液體25 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體25 mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	液體1 mL×1支	-20℃保存

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、恒溫水浴鍋/水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣自然風干或37 度烘箱風干，過30~50目篩。
二、測定步驟

分光光度計預熱30min以上，調節波長至520nm，蒸餾水調零。
NaNO₂標準液的配制：用蒸餾水將標準品稀釋0.8、0.6、0.4、0.2、0.1μmol/mL。
標準品稀釋表：

序號	稀釋前濃度（µmol/mL）	標準液體積（µL）	蒸餾水體積（µL）	稀釋后濃度（µmol/mL）
1	10	100	900	1
2	1	160	40	0.8
3	1	120	80	0.6
4	1	80	120	0.4
5	1	40	160	0.2
6	1	20	180	0.1

備注：實驗中每個標準管需100µL標準溶液

樣本測定：

試劑名稱	1.5mLEP管
試劑名稱	測定管	對照管	標準管	空白管
風干土樣（g）	0.1	0.1
NaNO₂標準液（μL）			100
蒸餾水（μL）	100	100		100
試劑一（μL）	365	365	365	365
試劑二（μL）	35		35	35
混勻后，置于37℃水浴鍋/恒溫培養箱反應24h。
試劑三（μL）	50	50	50	50
試劑二（μL）		35
立刻混勻， 8000rpm室溫離心5min
上清液（μL）	400	400	400	400
試劑四（μL）	100	100	100	100
混勻后，置于37℃水浴鍋/恒溫培養箱保溫20min。
試劑五（μL）	250	250	250	250
試劑六（μL）	250	250	250	250

混勻，顯色20min后，520nm下讀取各管吸光值，分別記為A測定、A對照、A標準、A空白。計算ΔA測定=A測定- A對照，ΔA標準=A標準-A空白。每個測定管需設一個對照管。標準曲線和空白管只需檢測1-2次。
三、S-NR活性計算
1、標準曲線繪制：
以0.8、0.6、0.4、0.2、0.1μmol/mL標準溶液為橫坐標（x軸），ΔA標準為縱坐標（y軸）繪制標準曲線，得到線性回歸方程y=kx+b，將ΔA測定代入方程得到x（μmol/mL）。
2、S-NR活性計算：
單位的定義：每g土樣每天中產生1μmol NO₂ˉ的量為一個 S-NR活力單位。
S-NR（U/g 質量）=x×V標準÷W÷T=0.1x÷W
V標準：反應體系中加入的標準液體積，0.1mL；W：風干土樣，g；T：反應時間，1d。
注意事項：

試劑一、試劑二和試劑四在冰上放置，用不完的試劑-20℃分裝保存，避免反復凍融。
ΔA測定過?。ㄐ∮?span style="font-family:Times New Roman, Times, serif">0.01），可延長反應時間（37℃水浴時間）。
當ΔA大于1時，可以將上清液用蒸餾水稀釋后，再進行測定，計算公式中乘以稀釋倍數。

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