土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介：

儲存條件
-20℃
中文名稱
土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Soil FDA Hydrolase Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號：BC0480-50T/24S

更新時間：2025-04-24

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：3802

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

土壤FDA水解酶活性檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

貨號：BC0480

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2支	-20℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1瓶	-20℃保存

溶液的配制：

1、試劑二：臨用前取1支加1.5 mL丙酮溶解，用不完的-20℃分裝保存一周，避免反復(fù)凍融；

2、標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg熒光素，臨用前加入3.03 mL 50%丙酮（丙酮（V）：蒸餾水（V）=1:1）配成10 μmol/mL的熒光素標(biāo)準(zhǔn)溶液，可45℃水浴促進(jìn)溶解，-20℃分裝保存兩周，避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明：

FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化，是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。

FDA是一種無色化合物，在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應(yīng)，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm處有強(qiáng)吸收峰，通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、臺式離心機(jī)、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、丙酮（不可快遞）、研缽、30-50目篩。

三、FDA水解酶活性計算

酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。

FDA活性（U/g 土樣）=（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品）×V反總÷W ÷T=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W

C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度 2μmol/mL；V反總：反應(yīng)總體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，1h=1/24d。

注意事項：

1. 盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣本，否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。

2. 測定之前進(jìn)行預(yù)實驗，若吸光值大于1.2，可適當(dāng)減少土樣質(zhì)量再測定。若吸光值過小，可增加土樣質(zhì)量或增加反應(yīng)時間來進(jìn)行測定。

實驗實例：

1、分別取兩管0.1g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，取上清稀釋5倍進(jìn)行測定，用1mL玻璃比色皿測定吸光值，計算ΔA測定=A測定-A對照=1.148-0.066=1.082，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499，按土壤質(zhì)量計算酶活得：

FDA活性（U/g 土樣）=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W×5（稀釋倍數(shù)）= 5204.01 U/g 土樣。

2、分別取兩管0.1g林土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，取上清稀釋5倍進(jìn)行測定，用1mL玻璃比色皿測定吸光值，計算ΔA測定= A測定-A對照=0.973-0.133=0.84，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.499-0=0.499，按土壤質(zhì)量計算酶活得：

FDA活性（U/g 土樣）=48×（ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）÷W×5（稀釋倍數(shù)）= 4040.08 U/g 土樣。

參考文獻(xiàn)：

[1] Sánchez-Monedero M A, Mondini C, Cayuela M L, et al. Fluorescein diacetate hydrolysis, respiration and microbial biomass in freshly amended soils[J]. Biology and Fertility of Soils, 2008, 44(6): 885-890.

[2] Paudel B R, Udawatta R P, Anderson S H. Agroforestry and grass buffer effects on soil quality parameters for grazed pasture and row-crop systems[J]. Applied Soil Ecology, 2011, 48(2): 125-132.

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