土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測試劑盒說明書 詳見附件
可見分光光度法
貨號: BC0110
規格: 50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體 100 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
標準液 | 液體10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
產品說明:S-PPO主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素,完成土壤芳香族化合物循環,用于土壤環境修復。S-PPO能夠催化鄰苯三酚產生紫色沒食子素,后者在430nm有特征光吸收。注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。 新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。測定步驟1、可見分光光度計預熱30min以上,調節波長至430nm,試劑三調零。2、標準液稀釋:用0.5mol/L HCl溶液將標準液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0 mg/mL。試驗中需標準品1000µL。3、標準液稀釋表:序號 | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標準液體積(µL) | 0.5mol/L HCl體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
1 | 0.2 | 1000 | 0 | 0.2 |
2 | 0.2 | 1000 | 1000 | 0.1 |
3 | 0.1 | 1000 | 1000 | 0.05 |
4 | 0.05 | 1000 | 1000 | 0.025 |
5 | 0.025 | 1000 | 1000 | 0.0125 |
6 | 0.0125 | 1000 | 1000 | 0.00625 |
7 | 0.00625 | 1000 | 1000 | 0.003125 |
8 | - | 0 | 1000 | 0 |
備注:實驗中每個標準管需要1mL標準溶液。4、標準曲線的建立:以0 mg/mL標準液調零,取1mL稀釋好的標準液于1mL玻璃比色皿中在430nm處測定吸光值A,根據吸光度(x)和濃度(y,mg/mL)做出標準曲線。5、操作表:試劑名稱 | 測定管 |
風干土樣(g) | 0.05 |
試劑一(μL) | 500 |
振蕩混勻,30℃水浴反應1h |
試劑二(μL) | 200 |
試劑三(μL) | 1750 |
振蕩數次,室溫靜置30min,取1mL上層液于1mL玻璃比色皿中,430nm處測定吸光值A。S-PPO活性計算根據標準曲線,將樣本吸光值A(x)帶入公式中,計算出樣本濃度y(mg/mL)。單位的定義:每天每g土樣中產生1mg紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。 S-PPO活性(U/g 土樣)=y×V提取相÷W÷T=840×yT:反應時間,1h=1/24d;V提取相:1.75mL;W:樣本質量,0.05g。 相關發表文獻:B Li,Y Ding, X Tang,et al. MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway. Journal of Receptor and Signal Transduction Research. August 2018;(IF2.998)
參考文獻:[1] Montgomery M W, Sgarbieri V C. Isoenzymes of banana polyphenol oxidase[J]. Phytochemistry, 1975, 14(5-6): 1245-1249.[2] Dogan S, Dogan M. Determination of kinetic properties of polyphenol oxidase from Thymus (Thymus longicaulis subsp. chaubardii var. chaubardii)[J]. Food chemistry, 2004, 88(1): 69-77.相關系列產品:BC0280/BC0285 土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測試劑盒BC0120/BC0125 土壤脲酶(S-UE)活性檢測試劑盒BC0140/BC0145 土壤酸性磷酸酶(S-ACP)活性檢測試劑盒 土壤系列 土壤多酚氧化酶(PPO)測試盒 土壤系列 土壤多酚氧化酶(PPO)測試盒