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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法氨基酸代謝系列BC0180-50T/48S半*氨酸(Cys)含量測試盒 氨基酸代謝

半*氨酸(Cys)含量測試盒 氨基酸代謝
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
半*氨酸(Cys)含量測試盒 氨基酸代謝
有效期
6個月
單位

英文名稱
Cysteine(Cys) Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

產品型號:BC0180-50T/48S

更新時間:2024-04-24

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :2019

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半*氨酸(Cys)含量檢測試劑盒說明書 詳見附件
可見分光光度法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0180
規格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
提取液液體25 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體45 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×22-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:用前一天,向試劑二中加5 mL蒸餾水充分溶解,再加磷酸1.25 mL,混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴2h;冷卻后加20 mL蒸餾水,4℃可保存2周。(一瓶即可做50T,為延長試劑盒使用時間,故多給一瓶)

  2. 標準品:10 mg半*氨酸。將標準品加入4.13mL蒸餾水得到20μmol/mL的標準液。4℃可以保存4周。

產品說明:
蛋白質含有三種含硫氨基酸:甲*氨酸*氨酸和半*氨酸(Cys)。其中,Cys是一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲*氨酸轉化而來,并且可與*氨酸互相轉化。Cys參與蛋白質二硫鍵的形成,經常是蛋白質活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調節表皮最下層的色素細胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過敏性皮膚等作用。
Cys還原磷鎢酸生成鎢藍,在600nm處有吸收峰;通過測定600nm吸光度,計算Cys含量。
技術指標:
檢出限:0.0053 μmol/mL
線性范圍:0.03125-3 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、磷酸和蒸餾水。

一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
  1. 液體樣本中半*氨酸提取:

取0.2mL液體樣本,加提取液0.3mL,充分混勻,11000rpm 4℃離心10min,取上清液待測。
  1. 組織中半*氨酸提取:


稱取約0.2g組織,加入0.5mL提取液,冰上充分研磨,11000rpm 4℃離心10min,取上清液待測。
二、測定步驟
  1. 分光光度計預熱30 min以上,調節波長到600nm,蒸餾水調零。

  2. 標準液的配制:用蒸餾水將20μmol/mL的標準液稀釋為210.50.250.1250.0625 μmol/mL濃度的標準溶液。

  3. 按下表加入各試劑

試劑名稱(μL測定管標準管空白管
樣本200--
標準品-200-
蒸餾水--200
試劑一500500500
試劑二300300300
混勻后室溫靜置15min,于600nm處測定吸光值。
三、半*氨酸含量計算
  1. 標準曲線的繪制:

以各標準溶液濃度為x軸,以?AA標準管-A空白管)為y軸做標準曲線,得到方程y=kx+b。將(A測定管-A空白管)帶入方程求x值。
  1. 半*氨酸含量計算:

(1)按液體樣本的體積計算
半*氨酸含量(μmol/mL=x×V樣總÷V=2.5x
(2)按樣本質量計算
半*氨酸含量(μmol/g 質量)=x×V樣總÷W=0.5x÷W
V:液體樣本體積,0.2mLV樣總:提取體系體積,0.5mLW:樣本質量,g
注意事項:
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定
相關發表文獻:
  1. Huang Q, Wang M, Xia Z. The SULTR gene family in maize (Zea mays L.): gene cloning and expression analyses under sulfate starvation and abiotic stress[J]. Journal of plant physiology, 2018, 220: 24-33.

  2. Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,et al. Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings. Ecotoxicology and Environmental Safety. August 2018;(IF4.527)

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