土壤銨態氮含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC1510

規格：50T/48S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前將試劑一A加入試劑一B中混勻備用，或按比例現用現配；避光2-8℃可保存2周。若變色則不能繼續使用。

2、 標準品：100 μg/mL NH₄⁺-N標準液。

產品說明：

土壤銨態氮是土壤速效氮的重要組成部分，可以被植物直接吸收利用。銨態氮指標對農業生產具有極其重要的作用。

在強堿介質中，土壤中的銨態氮與次氯酸鹽和*酚作用，生成靛酚藍染料，在630nm處有特征吸收峰，吸光值與銨態氮含量成正比。

技術指標：

低檢出限：0.0646 μg/mL

線性范圍：0.156-5 μg/mL

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、振蕩器、30~50目篩、研缽、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

按照土樣質量（g）：提取液體積（mL）為 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g新鮮土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清液待測。（土樣要求參考注意事項1.2.）

二、測定步驟

1. 可見分光光度計預熱30min，波長調至630nm，蒸餾水調零。

2. 標準液稀釋：臨用前取20μL 100μg/mL氮標準液，加入780μL蒸餾水，充分混勻，配制成2.5μg/mL標準液使用，現用現配。（實驗中每管需要400μL，為減小實驗誤差，故配制大體積。）

3. 加樣表：

三、計算公式

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準液×V提取÷W=2.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W

C標準液：標準液濃度，2.5μg/mL；V提取：提取液體積，1mL；W：樣本質量，g。

注意事項：

1、 土壤經風干或者烘干很容易引起銨態氮含量的變化，所以建議采用新鮮土壤進行測定。樣品采集后應于4℃下密封運輸和保存，并在3d內分析完畢。否則，應于-20℃（深度冷凍）下以小塊、小份保存，樣品中氨氮可以保存數周。當測定深度冷凍氨氮含量時，應控制解凍的溫度和時間。室溫環境下解凍時，需在4 h內完成樣品解凍、勻質化和提取；如果在4℃下解凍，解凍時間不應超過48 h。

2、 如果要比較不同樣本間的銨態氮含量，需將土樣烘干，按干重計算后再進行比較。

3、 如果樣本吸光值大于0.7，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。

實驗實例：

1、 取0.1g三葉草土加入1mL提取液震蕩提取1h離心，取上清之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定管=A測定管-A空白管=0.165-0.02=0.145，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.37-0.02=0.35，按樣本質量計算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=2.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W=2.5×0.145÷0.35÷0.1=10.36 μg/g 土樣。

2、 取0.1g林土加入1mL提取液震蕩提取1h離心，取上清之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定管=A測定管-A空白管=0.145-0.02=0.125，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.37-0.02=0.35，按樣本質量計算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=2.5×ΔA測定÷ΔA標準÷W=2.5×0.125÷0.35÷0.1=8.93 μg/g 土樣。

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