儲存條件
2-8℃
中文名稱
土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Soil Nitrite Reductase（S-NiR）Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號：BC2990-50T/24S

更新時間：2024-04-15

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：755

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

土壤亞硝酸還原酶（S-NiR）活性檢測試劑盒

可見分光光度法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

貨號：BC2990

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	粉劑×1支	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑四	液體30mL×1瓶	2-8℃保存
試劑五	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	液體1mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1、試劑一：臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解，2-8℃保存2周。臨用前根據(jù)用量用蒸餾水稀釋100倍，現(xiàn)用現(xiàn)配；

2、試劑二：臨用前加15mL蒸餾水備用，2-8℃保存2周；

3、試劑三：臨用前加15mL蒸餾水溶解，此溶液為飽和溶液，取上清使用即可。用不完的試劑2-8℃保存2周；

4、標(biāo)準(zhǔn)品：10μmol/mL*標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

土壤亞硝酸還原酶（Solid-Nitrite reductase，S-NiR）是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一，它是由土壤反硝化細(xì)菌產(chǎn)生的一種還原酶類，可將NO₂^-還原為NO，它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率，為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。

亞硝酸還原酶可將NO₂^-還原為NO，使樣本中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO₂^-減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱烘干，過30-50目篩。

二、測定步驟

1、分光光度計預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。

2、標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

序號	稀釋前濃度（µmol/mL）	標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL）	蒸餾水體積（µL）	稀釋后濃度（µmol/mL）
1	10	100	900	1
2	1	400	100	0.8
3	1	300	200	0.6
4	1	400	600	0.4
5	0.4	500	500	0.2
6	0.2	500	500	0.1
7	0.1	500	500	0.05

備注：實(shí)驗(yàn)中每個標(biāo)準(zhǔn)管需400µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3、樣本測定：

試劑名稱	無基質(zhì)管	空白管1	對照管	測定管	標(biāo)準(zhǔn)管	空白管
風(fēng)干土樣（g）	-	-	0.1	0.1	-	-
蒸餾水（μL）	-	200	200	-	-	-
試劑一（μL）	200	-	-	200	-	-
試劑二（μL）	200	200	200	200	-	-
充分混勻后，25℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)3h
試劑三（μL）	200	200	200	200	-	-
旋渦震蕩30s，10000rpm，4℃，離心10min					-	-
上清液（μL）	400	400	400	400	-	-
標(biāo)準(zhǔn)品（μL）	-	-	-	-	400	-
試劑四（μL）	400	400	400	400	400	400
試劑五（μL）	400	400	400	400	400	400
蒸餾水（μL）	300	300	300	300	300	700
充分混勻，室溫放置15min后，測定540nm處各管吸光值，分別記為A無基質(zhì)管、A空白管1、A對照管、A測定管、A標(biāo)準(zhǔn)管和A空白管2，計算ΔA測定=（A無基質(zhì)管-A空白管1）-（A測定管-A對照管），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管2（標(biāo)準(zhǔn)曲線、無基質(zhì)管、空白管1、空白管2只需做1-2次）。

三、S-NiR計算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，μmol/mL）。