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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC3320-50T/24S
更新時間：2025-04-21
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1443
010-50973130
產品分類
葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC3320
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑五 | 液體8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑三：臨用前用8 mL蒸餾水溶解備用。
試劑四：臨用前用8 mL蒸餾水溶解備用。
標準品：10 μmol/mL 磷標準液。臨用前用蒸餾水稀釋16倍至0.625 μmol/mL的標準溶液備用。
工作液的配制：試劑二中加入5 mL試劑一充分溶解備用。可以將工作液分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
定磷試劑的配制：按H2O:試劑三:試劑四:試劑五（V:V:V:V）=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，定磷劑現用現配。
注意：配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產品說明：
葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）是一種水解磷酸化合物的磷酸酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和無機磷，利用鉬藍法測定無機磷含量的增加，即可反映G6P活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。
若A大于1或者顯色完成后有沉淀產生，將上清液或者粗酶液用蒸餾水稀釋后再進行測定。
定磷試劑應現配現用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。
實驗實例：
取0.1g小鼠肌肉組織加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得A測定管=0.913、A對照管=0.869、A空白管=0.014、A標準管=0.509，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.913-0.869=0.044，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.509-0.014=0.495，按樣本質量計算酶活得：
G6P（U/g 質量）=312.5×ΔA÷ΔA標準÷W=312.5×0.044÷0.495÷0.1=277.7778 U/g 質量。
取0.1g稗草加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得A測定管=0.379、A對照管=0.237、A空白管=0.014、A標準管=0.509，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.379-0.237=0.142，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.509-0.014=0.495，按樣本質量計算酶活得：
G6P（U/g 質量）=312.5×ΔA÷ΔA標準÷W=312.5×0.142÷0.495÷0.1=896.4646 U/g 質量。
相關發表文獻：
Fan X, Hou T, Jia J, et al. Discrepant dose responses of bisphenol A on oxidative stress and DNA -ation in grass carp ovary cells[J]. Chemosphere, 2020, 248: 126110.
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