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生化檢測試劑盒-常量法
氨基酸代謝系列
BC1550-50T/24S谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)測試盒 氨基酸代謝
產(chǎn)品型號:BC1550-50T/24S
更新時間:2025-04-21
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪 問 量 :2143
010-50973130
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×2支 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體80 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準液 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
產(chǎn)品說明:
谷丙轉(zhuǎn)氨酶又叫丙*酸氨基轉(zhuǎn)移酶(EC 2.6.1.2),廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),在氨基酸代謝中具有重要作用。此外,哺乳動物肝細胞GPT活性很高,當肝細胞壞死,GPT釋放到血液中,血清GPT活性顯著增高。因此,GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測指標。
GPT催化丙*酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成丙酮酸和谷*酸;加入2,4-二硝*肼溶液,不僅終止上述反應(yīng),而且與酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在堿性條件下呈紅棕色,可以在505nm讀取吸光值并計算酶活力。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實驗實例:
取0.1g兔子肝臟組織加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后再按照測定步驟操作,測得A測定管=1.181,A對照管=0.458,計算?A =A測定管-A對照管=1.181-0.458=0.723,帶入標準曲線y=0.5286x+0.0362,計算x=(0.723-0.0362)÷0.5286=1.299,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
GPT活性(U/g質(zhì)量)=12x÷W=12×1.299÷0.1=155.88 U/g質(zhì)量。
取兔血清直接檢測,測得A測定管=0.514,A對照管=0.383,計算?A=A測定管-A對照管=0.514-0.383=0.131,帶入標準曲線y=0.5286x+0.0362,x=(0.131-0.0362)÷0.5286=0.179,按血清(漿)體積計算酶活得:
GPT活性(U/mL)=12x=12×0.179=2.148 U/mL。
參考文獻:
Zhao W, Wei H. Effects of cadmium on transaminase activities and structures of tissues in freshwater giant prawn (Macrobrachium rosenbergii) [J]. Journal of Fisheries of China, 1995,19(001):21-27.
Ohgami N, Upadhyay S, Kabata A, et al. Determination of the activities of glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase in a microfluidic system[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2007, 22(7): 1330-1336.
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