細(xì)胞檢測(cè)試劑的存放與使用要求至關(guān)重要,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可重復(fù)性和安全性。以下是詳細(xì)的規(guī)范指南:
1. 溫度控制
常規(guī)試劑(如緩沖液、染色劑):遵循說(shuō)明書推薦溫度,通常為 2–8℃冷藏(避免冷凍導(dǎo)致成分變性)。例如:臺(tái)盼藍(lán)溶液需避光保存于4℃。
酶類試劑(限制性內(nèi)切酶、連接酶):必須嚴(yán)格保存在 -20℃以下超低溫冰箱,分裝凍存以防止反復(fù)凍融失活。
特殊敏感型試劑(熒光標(biāo)記抗體):部分需存放于 液氮罐(-196℃) 以長(zhǎng)期保持活性。
2. 濕度管理
保持干燥環(huán)境(相對(duì)濕度<60%),使用硅膠干燥劑或除濕設(shè)備防止吸潮結(jié)塊。
避免靠近水源或加濕器放置,尤其對(duì)于粉末狀試劑(如MTT粉末)。
3. 光照防護(hù)
所有試劑均應(yīng)儲(chǔ)存在 棕色試劑瓶或鋁箔包裹容器中,避免紫外線/可見(jiàn)光降解。典型例子包括:
ATP熒光檢測(cè)試劑含熒光素酶,見(jiàn)光迅速失效;
DCFH-DA探針遇光會(huì)產(chǎn)生自發(fā)氧化熒光干擾實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面盡量使用黃色燈光替代白熾燈減少光損傷風(fēng)險(xiǎn)。
4. 穩(wěn)定性保障措施
防氧化處理:向試劑中充入惰性氣體(氮?dú)猓┲脫Q空氣,適用于易氧化物質(zhì)。
酸堿度監(jiān)控:定期檢測(cè)液體試劑pH值變化,超出范圍時(shí)立即廢棄。
震蕩混合預(yù)防沉淀:每次取用前充分顛倒混勻懸濁液型試劑。
二、細(xì)胞檢測(cè)試劑使用方法規(guī)范
1. 無(wú)菌操作準(zhǔn)則
生物安全性優(yōu)先:涉及細(xì)胞裂解物的試劑應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作,佩戴手套、口罩及護(hù)目鏡防止氣溶膠吸入。例如:提取基因組DNA時(shí)的蛋白酶K處理步驟。
移液器校準(zhǔn):使用經(jīng)計(jì)量認(rèn)證的移液設(shè)備,確保體積誤差<5%。禁止交叉使用不同精度量程的槍頭以避免交叉污染。
2. 有效期管控體系
開封后效期縮短機(jī)制:即使未過(guò)期也應(yīng)標(biāo)注一次啟用日期,并在標(biāo)簽上注明“OPENED ON: YYYY-MM-DD”。多數(shù)抗體開封后建議6個(gè)月內(nèi)用完。
質(zhì)控測(cè)試驗(yàn)證活性:關(guān)鍵試劑使用前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)有效性。比如:流式細(xì)胞術(shù)用的偶聯(lián)抗體需通過(guò)已知陽(yáng)性樣本驗(yàn)證結(jié)合能力。
3. 避免污染策略
專用耗材匹配原則:不同批次試劑配套使用原廠提供的專用比色皿/反應(yīng)管,防止材質(zhì)差異影響光學(xué)讀數(shù)準(zhǔn)確性。例如:某些PCR板蓋密封不良會(huì)導(dǎo)致邊緣蒸發(fā)效應(yīng)顯著改變反應(yīng)體系濃度。
樣品前處理標(biāo)準(zhǔn)化:血清滅活補(bǔ)體時(shí)統(tǒng)一采用56℃水浴30分鐘處理,離心速度恒定于3000×g以保證細(xì)胞碎片去除效率一致。
4. 廢棄物合規(guī)處置
分類收集容器:設(shè)置專用廢液缸區(qū)分有機(jī)溶劑(如甲醇固定液)、酸性溶液(醋酸酐)、重金屬鹽類(硝酸銀染色液),貼上對(duì)應(yīng)危化品標(biāo)識(shí)碼。
中和預(yù)處理步驟:傾倒強(qiáng)腐蝕性廢液前先用碳酸氫鈉中和至中性pH再排放下水道,符合《實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理?xiàng)l例》要求。
