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ELISA相關(guān)問題(二)

更新時間:2025-08-05點擊次數(shù):71

5. Q:明確標明種屬的試劑盒可以用來檢測其他種屬的樣本么?

AELISA試劑盒嚴格區(qū)分種屬,一般不推薦跨種屬檢測,不同種屬的同一個指標同源性相差可能會很大,抗體的特異性要求比較高,不同種屬樣本與抗體結(jié)合能力會有很大差別。

6. QELISA試劑盒只能檢測血清、血清、細胞上清液么?

A:通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,可以是血清、血漿、細胞上清等常規(guī)樣品,也可以是尿液、細組織勻漿液、細胞裂解液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。樣品中含有影響生物活性的物質(zhì)會影響檢測結(jié)果。

7. Q:試劑盒中的酶標板是包被好的么?

A:劑盒中提供的包被板已經(jīng)包被過檢測抗體,可以直接使用。進行ELISA實驗時僅限使用本試劑盒中的組分,不能使用別的板條進行實驗。96孔酶標板是可拆的,每條8孔。可以根據(jù)自己的實驗取出部分板條使用,剩余的酶標板放回含有干燥劑的鋁箔袋中,4度保存,不會影響酶標板性能。若拆封的酶標板沒有正確儲存,導(dǎo)致板子受潮,可能會影響檢測結(jié)果。用過的板條不可重復(fù)使用。

8. Q:試劑盒在使用前要室溫放置30min ,目的是什么?

AELISA試劑盒對于溫度的要求比較嚴格,溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素,這樣做主要是為了使試劑溫度一致,在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。

9. Q:試劑盒保存溫度是多少度?為什么說明書上寫的標準品是-20度,標簽上寫的是4度呢?

A:試劑盒保存溫度是4度,說明書中只有標準品標注的保存溫度是-20度,由于標準品是凍干的重組蛋白,-20度保存會延長重組蛋白的保存期限。試劑盒的有效期是6個月,凍干的重組蛋白能夠在4度保存6個月,但是如果有條件或者想更長時間保存,還是建議能夠?qū)藴势?/span>-20度保存。

10. Q:樣本收集后不能及時檢測低溫保存可以放多久?

A:樣本收集后24之內(nèi)進行檢測,放在4度冰箱即可。如果樣本收集后不能立即檢測,需將樣本置于低溫冰箱中,樣本3個月內(nèi)檢測可于-20度保存,若存放時間更久,需要用-80度冰箱保存。

11. Q:樣品反復(fù)凍融影響大么?

A:樣品反復(fù)凍融對蛋白影響非常大,能導(dǎo)致蛋白降解,非常不建議反復(fù)凍融樣品。一般蛋白含量豐富的樣本例如血清/血漿反復(fù)凍融1-2次,對于檢測結(jié)果影響不是非常大,但是其他類型的樣本,例如細胞上清液、肺泡灌洗液,反復(fù)凍融會使蛋白降解嚴重,對檢測結(jié)果影響非常大。

12. Q:生物素化抗體和酶結(jié)合物,稀釋后沒用完,還可以再用嗎?

A:稀釋后的生物素化抗體和酶結(jié)合物建議在當(dāng)天用完,放置時間太長可能會影響其活性。可根據(jù)自己實驗所需用量進行配制,不建議過量配制。


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