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GUS染色液的染色原理

更新時間:2022-07-29點擊次數:3651
  GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細菌基因組內的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶,該基因常作為融合標記用于植物轉基因分析和調控研究中。GUS染色的實驗目的是對植物樣本進行染色,因為絕大多數植物細胞內不存在內源GUS活性,因此GUS基因廣泛用作轉基因植物的報告基因。
 
  GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍色物質,該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學活性分析、免疫分析以及組織和細胞的組織化學染色,多用于轉基因植物的GUS基因表達分析。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
 
  GUS染色液使用注意事項:
 
  用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和器官的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。
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