5
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體...
查看更多2
Elisa試劑盒是將完成一個項目所需要的各種試劑、材料組合在一起,方便實驗人員使用的一種工具。由于分子生物學實驗中用到的試劑種類繁多,配置要求較高,但用量較少,因此通過試劑盒,可以減輕實驗人員的工作量,而且保證實驗結果的穩定。目前用于大腸桿菌質粒抽提的Elisa試劑盒很多,絕大部分Elisa試劑盒均在堿裂解法的基礎上,利用硅膠柱吸附質粒DNA,去除雜質,之后用洗脫緩沖液將吸附的質粒DNA洗脫下來。此法所得的質粒DNA絕大部分為超螺旋DNA,純度較高;同時,此法不需要使用酚、氯...
查看更多26
二抗是利用抗體是大分子的蛋白質具有抗原性的性質,去免疫異種動物,由異種動物的免疫系統產生的針對于此抗體的免疫球蛋白。抗原特異性指抗原具有能與相應抗體或致敏淋巴細胞發生特異結合的性質。二抗能與抗原特異性結合是可以結合的。如果一抗(原抗抗體)與將抗原*結合,則二抗處不會出現結合反應現象,如果一抗不足以將抗原*結合,則多于抗原會大刀二抗處反應。一抗一般是特異性抗體,二抗一般通用羊抗鼠、羊抗兔之類就可以。但是還需要先得弄懂抗原、一抗、二抗的相互作用。
查看更多22
一直以來,ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強、重復性好的優點,在科研中深受廣大,科研工作者的喜愛.而市面上各種試劑盒,數不勝數.讓大家都產生了,選擇性綜合癥,也挑不出適合自已的那個試劑盒.現在我們公司列出了一下,一些選購的常識,希望能為大家選購時提供幫助.客戶如何選擇ELISA試劑盒有以下幾點:*步、明確檢測何種蛋白第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性好第三步、尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒第四步、咨詢商家ELISA試劑盒使用的抗體類型:多抗還是單抗?單抗是針對...
查看更多19
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。1、國產血清質量差,這是*的,主要原因并不是生產廠家的責任,而是天然環境差和抗生素的大量使用。國內環境污染嚴重,同時飼養過程中抗生素極其濫用,有毒有害物質會大量殘留在血清中,終不利于細胞的生長。2、...
查看更多15
12
人們通常通過在56°C加熱30分鐘的辦法,來滅活血清中的補體,以及其中可能的微生物(比如支原體)的污染。加熱滅活帶來的問題是,血清中的氨基酸、維生素和生長因子等也會不同程度的被破壞。血清中的補體含量很低,即使在未稀釋的血清中,也觀察不到溶血現象。另外37°C的加熱能夠有效滅活補體。所以對血清而言,并不需要通過專門的熱滅活來滅活其中的補體。早期的血清制備中的濾膜的孔徑大于0.22um,不能有效的去除支原體的污染。熱滅活可以去除支原體的污染。但是現在血清制備中的終端濾膜的孔徑為0...
查看更多8