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嘌呤霉素(puromycin;PM)是一種抗生素,廣泛用作蛋白質(zhì)合成的抑制劑。其結(jié)構(gòu)與氨酰tRNA3′端上的AMP結(jié)構(gòu)相似,肽酰轉(zhuǎn)移酶能促使氨基酸與嘌呤霉素結(jié)合形成肽酰嘌呤霉素,從核糖體上脫落,從而使蛋白質(zhì)合成反應(yīng)中斷。嘌呤霉素的作用如下:嘌呤霉素的作用:嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomycesalboniger)發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,嘌呤霉素Puromycin通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽性菌,各種動物和昆蟲細胞。嘌呤霉素Pur...
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Bradford法測蛋白濃度是利用蛋白質(zhì)-染料結(jié)合的原理,定量地測定微量蛋白質(zhì)濃度的快速靈敏的方法。Bradford法測蛋白濃度原理考馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。考馬斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)—色素結(jié)合物在595nm波長下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍結(jié)合在2min左右的時間內(nèi)達到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該...
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Bradford法又稱考馬斯亮藍法,是Bradford于1976年建立起來的一種蛋白質(zhì)濃度的測定方法。bradford法定量蛋白質(zhì)的原理是馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。考馬斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;以下是bradford法定量蛋白質(zhì)的原理及含量測定流程bradford法定量蛋白質(zhì)的原理考馬斯亮藍(CBB)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。考馬斯亮藍在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)—色素...
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血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質(zhì)高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。胎牛血清的主要作用1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂...
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TBS緩沖液是Tris-HCl緩沖鹽溶液,為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗免疫染色的組織或Western?Blot?中的蛋白印跡膜等,是常用分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,可用于免疫金銀染色中清洗組織,亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。Tris緩沖鹽水(TBS):10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1調(diào)pH7.4;操作步驟(僅供參考):1、石蠟切片脫蠟水...
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PDA培養(yǎng)基作用:PDA(PotatoDextroseAgar(Medium))培養(yǎng)基又稱馬鈴薯葡萄糖瓊脂,是一種半合成培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。PDA培養(yǎng)基的配制:(僅供參考)(1)稱量和熬煮按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。(2)加熱溶解把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),...
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果膠酶是一種天然的復(fù)合多糖類高分子化學(xué)物,通常包括原果膠酶、果膠甲酯水解酶、果膠酸酶,通過它們的聯(lián)合作用使果膠質(zhì)得以*分解。由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而成,適用于果汁榨取、濃縮過濾、果汁澄清、膜組織分離。在食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)行業(yè)具有廣泛的用途。果膠酶的作用果膠酶由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而得。外觀呈淺黃色粉末狀。果膠酶主要用于果蔬汁飲料及果酒的榨汁及澄清,對分解果膠具有良好的作用。天然的果膠質(zhì)在原果膠酶作用下,轉(zhuǎn)化成水可溶性的果膠;果膠被果膠甲酯水解酶催化去掉甲酯基團,生成果膠酸;果膠酸經(jīng)...
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木瓜蛋白酶(Papain)簡稱木瓜酶,又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Caricapapaya)果實中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革和紡織等行業(yè);以未成熟的番木瓜乳液為原料,經(jīng)過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。木瓜蛋白酶的提取方法:(僅供參考)由木瓜的未成熟果實,經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘...
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