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異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。當有乳糖存在時,lac操縱子(元)即可被誘導。在這個操縱子(元)體系中,真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞,經b-半乳糖苷酶催化,轉變為半乳糖。后者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白,使蛋白構象變化,導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。材料1、誘導表達材料(1)LB(Luria—Bertani))培養基酵母膏(Yeastextract)5g蛋白胨(Peptone)10gNaCl1...
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CCK-8為細胞增殖檢測試劑盒,細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。必須強調指出,通過細胞分裂,可以將復制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去。可見,細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。CCK8實驗步驟如下。CCK-8實驗步驟1、在96孔板中配置100μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時(37℃,5%CO2)。2、向培養板加入10μl不同濃度的待測物質。3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6、12、24或48小時)。4、向...
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CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒,為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。活力計算:.細胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)]×100A(加藥):具有細胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度...
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IPTG是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG溶液的配制很簡單:在8ml蒸餾水中溶解2gIPTG后,用蒸餾水定容10ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃。IPTG的使用方法:先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并進行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20?mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100μl的Amp(100mg/...
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結晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。結晶紫是一種堿性染料,可以和細胞核中的DNA結合,從而產生細胞核染色。結晶紫染液的配制方法如下:結晶紫染液的配制結晶紫(crystalviolet)液:結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL將兩液混勻置24h后過濾即成。結晶紫染液使用方法1.樣品處理a)對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘。換...
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結晶紫(又叫甲基紫,俗名紫藥水)pH0.5(綠)~2.0(藍)。以冰醋酸作溶劑,用酸滴定液滴定堿時,常用的指示劑為結晶紫,還有α-萘酚苯甲醇(0.2%冰醋酸溶液,其堿式色為黃色,酸式色為綠色)和喹哪啶紅(0.1%甲醇液,其堿式色為紅色,酸式色為無色)結晶紫性狀:具有金屬光澤的暗綠色結晶形粉末。熔點為215℃(分解)。溶于水、乙醇和三氯甲烷,溶液呈紫色。不熔于,濃酸中呈黃色,當pH值增大時其顏色變化是黃→綠→藍→紫.與Sn4+、Tl3+、Au3+和Sb3+的鹵絡陰離子及MoO、...
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